【摘 要】
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目的:探究原花青素提高帕金森模型细胞活力的机制.方法:实验1-用不同浓度鱼藤酮处理(1μmol/L,2.5μmol/L,5μmol/L,10μmol/L,每组6个复孔)人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y 24 h,
【机 构】
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绍兴文理学院医学院基础医学部,浙江 绍兴312000
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目的:探究原花青素提高帕金森模型细胞活力的机制.方法:实验1-用不同浓度鱼藤酮处理(1μmol/L,2.5μmol/L,5μmol/L,10μmol/L,每组6个复孔)人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y 24 h,使用MTT法检测其细胞活力,选择合适的浓度(10μmol/L)构建帕金森疾病(PD)细胞模型.实验2-将SH-SY5Y细胞分为对照组与实验组(每组4个复孔),10μmol/L的鱼藤酮处理24 h后使用显微镜观察细胞的数目.实验3-将SH-SY5 Y细胞分为对照组与实验组(每组3个复孔),按上述方法处理,PI染色后流式细胞仪检测细胞周期.实验4-SH-SY5Y细胞预孵育浓度为10μg/ml的原花青素(PC)4 h后,使用浓度为10μmol/L的鱼藤酮继续处理,设置对照组,原花青素单独处理组,鱼藤酮单独处理组(每组6个复孔),处理24 h后,使用MTT法检测各组细胞活力.实验5-将SH-SY5Y细胞预孵育原花青素4 h后,用鱼藤酮(10μmol/L)继续处理24 h,设置对照组,鱼藤酮单独处理组(每组3个复孔),DCFH-DA探针染色后流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)含量的变化.结果:与对照组相比,鱼藤酮处理组的SH-SY5Y细胞活力明显下降(2.5μmol/L,P<0.01;5μmol/L和10μmol/L,P<0.01),数量明显减少;细胞周期也发生改变,处于G0/G1期的细胞比例增加(33.00％vs 44.53％),处于S期(14.97％vs 15.29％)无明显差别,处于G/M(32.73％vs 21.93％)的细胞比例减少.与鱼藤酮单独处理组相比,原花青素预孵育组SH-SY5Y细胞活力明显上升(P<0.01),ROS的含量大幅度减少(P<0.01).结论:原花青素能够通过清除ROS来提高PD模型细胞的细胞活力.
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