目的 研究肿瘤坏死因子α(TNF-α)对肾小球系膜细胞(GMCs)胞内钙离子浓度([Ca2+]i)及细胞收缩的影响,证明TNF-α通过1,4,5-三磷酸肌醇受体(IP3Rs)增强GMCs对缩血管物质的易感性是肝肾综合征的重要机制.方法 应用大鼠GMCs株,测量时均选无钙缓冲液及内皮素(ET)刺激.分正常对照ET刺激组(0h组)、TNF-α处理4 hET刺激组(4h组)、TNF-α处理24 hET刺激组(24 h组)；另设上述3组于ET前10 min加入IP3Rs阻断剂2-氨基乙氧基联苯硼酸盐(2-APB).应用Fluo-3/AM标记及激光共聚焦显微镜,观察TNF-α预处理后GMCs对ET刺激后[Ca2+]i的变化及2-APB阻断后的变化.同时测量各组GMCs收缩前后表面积的变化以明确收缩幅度.结果 ET刺激可使GMCs在短时间内[Ca2+]i迅速、显著增加,TNF-α4 h、24 h组[Ca2+]i上升幅度尤为明显[4 h:(648.08±267.11) nmol/L;24 h:(879.30±260.29) nmol/L;0 h:(619.93±258.94) nmol/L,F=5.486,4 h vs0 h:P＜0.05;24 h vs0 h:P＜0.05;24 h vs4 h:P＞0.05].2-APB阻断后3组细胞对ET刺激均失去反应,[Ca2+]i无上升.ET刺激可使各组细胞面积缩小；TNF-α 4 h、24 h组上述效应更加明显[4h:(2198 ±340) μm2；24 h:(2260±553)μm2；0 h:(2436 ±474)μm2,F =4.001,4h vs 0 h:P＜0.05;24 h vs0 h:P＜0.05;24 h vs4 h:P＞0.05).结论 TNF-α可增加ET刺激引起的[Ca2+]i上升进而引起细胞收缩,并证明是通过IP3Rs通路产生效应的,这可能是肝肾综合征时肾脏对缩血管物质产生高敏性进而引起肾小球滤过率下降的重要机制。
肿瘤坏死因子α增强肾小球系膜细胞胞内钙释放参与肝肾综合征发病机制
【摘 要】
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目的 研究肿瘤坏死因子α(TNF-α)对肾小球系膜细胞(GMCs)胞内钙离子浓度([Ca2+]i)及细胞收缩的影响,证明TNF-α通过1,4,5-三磷酸肌醇受体(IP3Rs)增强GMCs对缩血管物质的易感性是肝肾综合征的重要机制.方法 应用大鼠GMCs株,测量时均选无钙缓冲液及内皮素(ET)刺激.分正常对照ET刺激组(0h组)、TNF-α处理4 hET刺激组(4h组)、TNF-α处理24 hET刺
【机 构】
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110001沈阳,中国医科大学附属第一医院传染科,110001沈阳,中国医科大学附属第一医院传染科,110001沈阳,中国医科大学附属第一医院传染科
【出 处】
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中国医师杂志
【发表日期】
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2013年15期
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