体外重折叠核糖核酸酶A及其荧光结构表征

来源 :浙江大学学报:农业与生命科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xilotola
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核糖核酸酶A(RNase A)作为蛋白质体外重折叠研究的模型蛋白,考察了稀释复性过程中脲浓度、稀释倍数、氧化还原环境(GSH浓度和GSH/GSSG比例)、pH值、温度以及聚集抑制剂的添加对该酶活性回收率的影响.在变性蛋白浓度为100μg.mL^-1,复性液含有2mol.L^-1脲,GSH浓度2mmol.L^-1,GSH/GSSG比为4:1,pH8.0,并添加终浓0.1%的PEG,转速为150r.min^-1,温度37℃的条件下复性,RNase A的活力回收率可达70%以上.利用荧光分析法对RNase A复
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