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目的构建真核表达载体pcDNA3.0-Hsp70,并在胆囊癌细胞SGC996中进行表达。方法构建真核表达载体pcDNA3.0-Hsp70,经EcoRⅠ及BarnHⅡ双酶切鉴定并测序;通过脂质体法转染SGC996胆囊癌细胞,经G418抗性筛选获得稳定表达细胞株;用流式细胞术检测其表达情况。结果酶切电泳和DNA测序证实载体构建正确;体外转染入SGC996细胞中后,可见转染细胞有Hsp70蛋白的表达。结论成功构建了pcDNA3.0-Hsp70真核表达载体,为研究Hsp70在肿瘤免治疗中的作用奠定了基础。