【摘 要】
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目的:表达、纯化腺病毒5型knob蛋白,并制备其单克隆抗体(mAb).方法:克隆并表达腺病毒的knob蛋白,其氨基端带有6-His标签.纯化后的蛋白免疫BALB/c小鼠,经融合、筛选制备特异性
【机 构】
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上海交通大学生命科学技术学院,上海市肿瘤研究所
【基金项目】
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国家重点基础研究发展计划(973计划);
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目的:表达、纯化腺病毒5型knob蛋白,并制备其单克隆抗体(mAb).方法:克隆并表达腺病毒的knob蛋白,其氨基端带有6-His标签.纯化后的蛋白免疫BALB/c小鼠,经融合、筛选制备特异性mAb.结果:成功表达了knob蛋白.SDS-PAGE显示所表达蛋白的相对分子质量(Mr)约为23 000.获得了2株分泌针对knob的杂交瘤细胞系(8D7和6D4),其分泌的mAb的Ig亚类(型)均为IgG2b.ELISA检测,对应腹水mAb的效价分别为1∶2.1×105,1∶2.2×105.Western blot结果显示抗knob mAb具有良好的特异性.结论:成功地制备了knob蛋白及其mAb.
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