【摘 要】
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对IBDV在微型生物反应器转管DF-1细胞系上繁殖特性进行了较为系统的研究,转管中接种DF-1细胞3×107个左右,培养6d细胞增至2.4~2.5×108个,确定培养6d为最佳接毒时间;病毒的最
【基金项目】
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国家农业科技成果转化基金资助项目(2011GB2D000007);国家自然科学基金资助项目(30972187)
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对IBDV在微型生物反应器转管DF-1细胞系上繁殖特性进行了较为系统的研究,转管中接种DF-1细胞3×107个左右,培养6d细胞增至2.4~2.5×108个,确定培养6d为最佳接毒时间;病毒的最佳接种剂量为0.78TCID50/细胞(即0.78MOI),最佳收毒时间为接毒后的28h;上清和全悬液毒价呈平行关系,但后者更高,可达109.5 TCID50/mL以上。细胞数增长与糖耗间呈明显平行关系,在细胞生长期内(6d)平均每个细胞耗糖量为6.5×10-10 g/24h,可根据糖耗量的多少推测细胞生长状态和数量;接毒后糖耗速率的高峰要先于病毒滴度高峰,在糖耗高峰出现后下降至趋于零的瞬间收获,可获得较高毒价的病毒液。在毒价高峰时收获1/2毒液后9h,收获1/3毒液后18h可再次获得最高毒价的毒液,这可能与高密度培养中及时补充新的培养液有关。本试验为IBDV HQ株在生物反应器上大规模培养提供了参考依据。
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