【摘 要】
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为获得高效表达犬流感病毒(CIV)HA和NA抗原的疫苗株,本实验通过反向遗传操作技术将A/canine/Zhejiang/01/2010 (H3N2)犬流感病毒(简称ZJCIV)的HA和NA基因与A/Puerto Rico/8/3
【机 构】
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内蒙古农业大学兽医学院,内蒙古呼和浩特010018中国农业科学院上海兽医研究所,上海200241;中国农业科学院上海兽医研究所,上海,200241;天津生机集团股份有限公司,天津,300384;内蒙古
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为获得高效表达犬流感病毒(CIV)HA和NA抗原的疫苗株,本实验通过反向遗传操作技术将A/canine/Zhejiang/01/2010 (H3N2)犬流感病毒(简称ZJCIV)的HA和NA基因与A/Puerto Rico/8/34(H1N1)病毒(PR8)的6个内部基因进行重组,拯救并获得了一株重组病毒CIV-PR8.分别用含100 EID50的CIV-PR8和ZJCIV感染SPF鸡胚,含2×103 TCID50的CIV-PR8和ZJCIV感染MDCK细胞,不同时间段取病毒样品测定血凝效价和TCID50值.两者比较表明,CIV-PR8分别在接种后36 h和48 h时血凝效价达到峰值,鸡胚尿液中效价可达210,为野生病毒株的16倍；细胞上清血凝价可达28,为野生病毒株的4倍；病毒增殖曲线表明通过鸡胚扩增和细胞扩增,CIV-PR8的滴度均高于野生病毒株ZJCIV.结果表明,拯救的CIV-PR8增殖能力明显高于野生病毒株ZJCIV,该重组病毒有望成为犬流感疫苗研制的候选病毒株.
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