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目的
研究刺五加皂甙(ASE)预处理诱导PC12细胞对缺血的耐受及相关机制。
方法采用MTT比色分析、细胞形态学观察、Western Blot法以及凝胶电泳迁移实验(EMSA)等方法比较ASE预处理对PC12细胞缺血模型(氧葡萄糖剥夺模型)的影响。
结果在PC12细胞缺血模型中，9 h氧葡萄糖剥夺可明显降低PC12细胞活力，细胞存活率为(49.12±3.22)%。然而ASE 24 h预处理则显著抑制9 h氧葡萄糖剥夺对细胞的损伤，细胞存活率显著提高(67.97±2.92)%，实验组与对照组间相比较差异有显著统计学意义(F＝473.67，P<0.01)；细胞形态学显示，刺五加皂甙(终浓度50 μg/ml)预处理再缺血处理9 h，可明显减轻缺血9 h所致的细胞损害，较多细胞保留突起，突起网络依然存在，胞体完好。Western Blot结果表明ASE预处理能明显增加缺氧诱导因子-1α(HIF-1α蛋白)表达，差异有显著统计学意义(F＝167.18，P<0.01)；ASE预处理诱导表达的HIF-1具有生物学活性，它能与DNA结合，并激活下游基因促红细胞生成素(EPO蛋白)的表达，差异亦有显著统计学意义(F＝128.37，P<0.01)。
结论ASE预处理可以诱导PC12细胞对缺血的耐受，其诱导耐受的作用可能与ASE预处理诱导PC12细胞HIF-1α稳定表达、提高HIF-1与DNA结合活性以及增加其下游基因EPO蛋白表达有关。