观察原代人脐静脉内皮细胞(primary human umbilical vein endothelial cells，HUVECs)被登革热2型病毒(dengue virus 2, DENV-2)感染后，与人外周血巨噬细胞(macrophages, Mø)共培养，两种细胞主要炎性因子产生的变化。
方法密度梯度离心法从人体外周血浓缩白细胞中分离单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell, PBMC)，贴壁得到单核细胞，通过巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)刺激，流式细胞术检测CD14＋CD11b＋细胞纯度，得到Mø。DENV-2感染HUVECs，real-time PCR检测HUVECs细胞内病毒NS1 mRNA表达量变化。HUVECs被DENV-2感染后，通过Transwell法与Mø共培养，对照组用鞘氨醇-1-磷酸(sphingosine-1-phosphate, S1P)1型特异性受体激动剂CYM-5442预处理24 h去除药物后感染病毒。Real-time PCR分别检测HUVECs产生的IL-6、IL-8 mRNA和Mø产生的IL-6、IL-8、TNF-α、IL-1β mRNA的逆转录水平；ELISA双抗体夹心法检测培养上清中上述细胞因子的表达。
结果HUVECs DENV-2被感染后，细胞内NS1基因转录水平逐渐上升，24 h时达峰值(2.66±0.53，P<0.05)后下降。流式细胞术检测Mø纯度为(89.16±2.07)%。HUVECs被DENV-2感染后IL-6、IL-8 mRNA转录水平均上调，24 h mRNA转录量达到峰值；IL-6为16.10±0.17，IL-8为29.76±0.58。未感染组转录水平IL-6为1.46±0.67，IL-8为1.60±0.54。Mø被感染后IL-6、IL-8、TNF-α、IL-1β mRNA表达量均有明显上升，在24 h mRNA IL-6表达量为45.82±3.72，IL-8为52.34±1.69(12 h)，TNF-α为28.94±1.75，IL-1β为30.96±1.44；未感染组转录水平IL-6为1.16±0.22，IL-8为1.15±0.21，TNF-α为1.11±0.09，IL-1β为1.47±0.31。HUVECs与Mø共培养后上述细胞因子在各时间点的转录水平有所下降，依然明显高于未感染对照组。CYM-5442预处理后，共培养组感染的HUVECs IL-6、IL-8的mRNA转录水平明显下降(P<0.01)，Mø中IL-6、IL-8、TNF-α、IL-1β mRNA转录水平也有下调(P<0.01)。
结论DENV-2能够感染原代HUVECs，且被DENV-2感染的HUVECs能够活化Mø并促使其分泌大量的IL-6、IL-8、TNF-α、IL-1β，同时活化的Mø能一定程度地降低HUVECs炎症细胞因子的产生。