小反刍兽疫病毒H基因的原核表达与鉴定

来源 :中国预防兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：beret85

【摘要】

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根据GenBank中已发表的小反刍兽疫病毒（PPRV）Nigeria 75／1株的H基因序列，设计上下游引物并添加BamH Ⅰ酶切位点，以含有小反刍兽疫病毒H基因的Topo—PPRVH质粒为模板进行PCR扩增，扩

【作者】

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李伟李刚邱文英贾凤芹曾妮吴素丽

【机构】

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中国农业科学院北京畜牧兽医研究所

【出处】

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中国预防兽医学报

【发表日期】

：

2009年2期

【关键词】

：

小反刍兽疫病毒 H基因原核表达 peste des petits ruminants virus （PPRV） H gene prokaryotic ex

【基金项目】

：

“十一五”国家科技支撑计划（2006BAD06A13-4）,“948”项目（2007.G57-C）,FAO/IAEA项目（14515-0,R1）

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根据GenBank中已发表的小反刍兽疫病毒（PPRV）Nigeria 75／1株的H基因序列，设计上下游引物并添加BamH Ⅰ酶切位点，以含有小反刍兽疫病毒H基因的Topo—PPRVH质粒为模板进行PCR扩增，扩增产物克隆于pEASY—T载体中，用BamH Ⅰ单酶切后将目的片段连接到原核表达载体pET-32a（＋）中，核酸序列分析证明，成功构建了PPRVH原核表达质粒pET-32a-H。将pET-32a—H重组质粒转化大肠杆菌BL21（DES）进行融合表达，经SDS—PAGE电泳，可见H蛋白获得了高效表达

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