人白介素24cDNA克隆、突变纠正和原核表达

来源 :西安交通大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:Richard0936
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目的 获取人白介素24(IL-24)cDNA,构建原核表达载体以表达含有谷胱甘肽S转移酶(GST)的融合蛋白GST-IL-24。方法 以人外周血单核细胞(PBMC)总RNA为模板,RT-PCR扩增IL-24cDNA,克隆入原核表达载体pGEX-4T-2,测序结果显示在IL-24cDNA第223位G→A,370位T→C,从而导致其编码蛋白的氨基酸发生改变:A75T,H124Y,通过二次PCR将其纠正,重组载体pGEX-IL-24转化大肠杆菌BL21(DE3),异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达
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