【摘 要】
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目的 探究miR-34a-5p通过靶向胰岛素样生长因子ⅡmRNA结合蛋白3（IMP3）、程序性死亡配体-1（PD-L1）表达对乳腺癌细胞生物学行为的影响。方法 利用HumanProteinAtlas和GEPIA在线分析TCGA数据库和GTEx项目中乳腺癌及正常组织IMP3、PD-L1的表达水平、患者的预后生存期；qRT-PCR、Westernblot检测160例患者乳腺癌组织及癌旁正常组织中miR
【基金项目】
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江西省卫生健康委员会科技计划项目（20204844）；
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目的 探究miR-34a-5p通过靶向胰岛素样生长因子ⅡmRNA结合蛋白3（IMP3）、程序性死亡配体-1（PD-L1）表达对乳腺癌细胞生物学行为的影响。方法 利用HumanProteinAtlas和GEPIA在线分析TCGA数据库和GTEx项目中乳腺癌及正常组织IMP3、PD-L1的表达水平、患者的预后生存期；qRT-PCR、Westernblot检测160例患者乳腺癌组织及癌旁正常组织中miR-34a-5p、IMP3、PD-L1mRNA与蛋白表达；Pearson检验分析miR-34a-5p分别与IMP3mRNA、PD-L1mRNA的相关性；免疫组化检测患者乳腺癌及正常组织IMP3、PD-L1、白细胞分化抗原44变异体6（CD44v6）的表达，分析IMP3、PD-L1表达水平与患者临床病理参数的关系；靶基因预测、双荧光素酶报告实验验证miR-34a-5p对IMP3、PD-L1的靶向调控作用。MCF7细胞分为control组、miR-NC组、miR-34a-5p组、miR-NC+pcDNA-NC组、miR-NC+IMP3组、miR-NC+PD-L1组、miR-34a-5p+pcDNA-NC组、miR-34a-5p+IMP3组和miR-34a-5p+PD-L1组，采用MTT法、克隆形成、划痕、Transwell小室实验测定细胞增殖活力、迁移、侵袭能力；Westernblot检测IMP3、PD-L1、CD44v6、基质金属蛋白酶2（MMP-2）、MMP-9、E-钙黏蛋白（E-cadherin）表达水平。结果 生物数据库显示乳腺癌组织IMP3、PD-L1表达水平越高，患者生存期越短（P＜0.05）；qRT-PCR、Westernblot结果显示，乳腺癌组织miR-34a-5p表达水平明显低于正常组织，IMP3、PD-L1mRNA与蛋白表达水平明显高于正常组织，miR-34a-5p表达分别与IMP3mRNA、PD-L1mRNA呈明显负相关（P＜0.05）；免疫组化结果显示，乳腺癌组织IMP3、PD-L1、CD44v6呈阳性表达，且IMP3、PD-L1表达越高，TNM分期越晚，肿瘤分化程度越低、越容易发生淋巴结和远处转移（P＜0.05）；双荧光素酶实验验证了miR-34a-5p对IMP3、PD-L1的靶向调控作用；与control组和miR-NC组相比，miR-34a-5p组的细胞活力、单克隆形成数目、划痕愈合率、细胞侵袭数目、IMP3、PD-L1、CD44v6、MMP-2、MMP-9蛋白表达明显降低，E-cadherin蛋白表达明显升高，与miR-NC+pcDNA-NC组相比，miR-NC+IMP3组和miR-NC+PD-L1组细胞活力、单克隆形成数目、划痕愈合率、细胞侵袭数目、IMP3、PD-L1、CD44v6、MMP-2、MMP-9蛋白表达明显升高，E-cadherin蛋白表达明显降低，与miR-34a-5p+pcDNA-NC组相比，miR-34a-5p+IMP3组和miR-34a-5p+PD-L1组细胞活力、单克隆形成数目、划痕愈合率、细胞侵袭数目、IMP3、PD-L1、CD44v6、MMP-2、MMP-9水平升高，E-cadherin水平降低（P＜0.05）。结论 miR-34a-5p能够通过靶向调控IMP3、PD-L1表达抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移、侵袭和上皮间质化（EMT）。
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