【摘 要】
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根据GenBank公布的PCV2与PRRSV的核苷酸序列选定2个主要的抗原表位,2个抗原表位通过1个柔性的Linker相连,最后对目标片段的核苷酸序列进行修饰,使它们适合在DE3宿主菌中表达,
【机 构】
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重庆市畜牧科学院农业部养猪科学重点实验室; 重庆市养猪科学市级重点实验室;
【基金项目】
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重庆市科委基本业务费资助项目(2013cstc-jbky-00903)
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根据GenBank公布的PCV2与PRRSV的核苷酸序列选定2个主要的抗原表位,2个抗原表位通过1个柔性的Linker相连,最后对目标片段的核苷酸序列进行修饰,使它们适合在DE3宿主菌中表达,合成目的片段729bp;将融合的核酸序列通过酶切位点BamhⅠ和XholⅠ插入pGEX-4T-1原核表达载体;用BL21(DE3)作为宿主菌,37℃下0.5mmol/L IPTG诱导表达,表达量为0.2g/L;重组蛋白免疫按80mg/头免疫仔猪,免疫后2周可使仔猪同时产生PVC2与PRRSV抗体。
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