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【目的】探讨行囊胚活检后,活检胚胎最佳的冷冻时机。【方法】258枚小鼠优质囊胚进行囊胚活检,分别在活检后0 h(n=43),0.5 h(n=39),1 h(n=50),2 h(n=49)进行玻璃化冷冻,仅行活检的新鲜囊胚(n=48)以及冷冻的未活检囊胚(n=29)分别作为对照组,观察各组的复苏率、重新扩张率和孵出率,并计数囊胚细胞总数、凋亡细胞数、囊胚DNA完整率和活检部位凋亡细胞数。【结果】各组的存活率、重新扩张率和孵出率无差别;平均囊胚细胞总数、凋亡细胞数、囊胚DNA完整率和活检部位凋亡细胞数差别无统计学意义。【结论】小鼠囊胚活检后不同时间点冷冻效果未观察到差异,可根据工作需要灵活安排活检囊胚的冷冻时间。