人组织因子基因RNAi载体pENTR^TM/U6-TF-shRNA的构建与鉴定

来源 :中国组织工程研究与临床康复 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yoyo1028
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目的:RNAi效应与基因转移有密切关系。拟通过构建组织因子基因RNAi载体,为达到阻止凝血过程的启动打下基础。方法:实验于2006-11/2007-05在南方医科大学中医药学院中医症候实验室完成。利用Invitrogen公司在线软件设计人组织因子基因(NM_001993)干扰片段,合成shRNA序列,再行寡核苷酸双链的合成,退火后形成的寡核苷酸双链克隆到pENTRTM/U6载体的黏性末端,连接产物转化到感受态细胞,增菌,质粒感受态扩增,质粒DNA小提、测序。结果:合成的寡核苷酸双链退火处理后,经4%琼脂糖
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