【摘 要】
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目的 观察肾损伤分子-1(Kim-1)特异性小干扰RNA(siRNA)沉默Kim-1分子后,对786-0细胞增殖和细胞周期的影响.方法 利用脂质体转染方法将对人Kim-1基因序列特异的siRNA (50 nmol/L)转染进入786-0细胞中,转染后48 h采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测Kim-1基因的表达,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖,转染后48 h采用流式
【机 构】
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450052郑州大学第一附属医院泌尿外科河南省泌尿外科研究所郑州市泌尿外科肿瘤分子生物学重点实验室,450052郑州大学第一附属医院泌尿外科河南省泌尿外科研究所郑州市泌尿外科肿瘤分子生物学重点实验室,
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目的 观察肾损伤分子-1(Kim-1)特异性小干扰RNA(siRNA)沉默Kim-1分子后,对786-0细胞增殖和细胞周期的影响.方法 利用脂质体转染方法将对人Kim-1基因序列特异的siRNA (50 nmol/L)转染进入786-0细胞中,转染后48 h采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测Kim-1基因的表达,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖,转染后48 h采用流式细胞仪检测细胞周期.结果 Kim-1-siRNA能有效下调786-0细胞中Kim-1基因的表达水平,抑制细胞生长,使细胞周期阻滞在G0/G1期[3组转染后96 h的增殖抑制率分别为0、(3.80±1.24)%、(54.31±3.82)%,G0/G1期所占的比例分别为(38.44±1.82)%、(42.06±2.15)%、(63.69±2.87)%],差异有统计学意义(P<0.05).结论 siRNA能有效抑制786-0细胞中Kim-1基因的表达,Kim-1基因表达下调影响786-0细胞的增殖并将细胞周期阻滞于G0/G1期。
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