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目的
探讨Yes相关蛋白1(Yes-associated protein 1,YAP1)在儿童肝母细胞瘤的表达及其与患儿预后的关系,以及YAP1对肝母细胞瘤增殖和凋亡的影响。
方法采用免疫组化染色检测YAP1和β-连环蛋白(β-catenin)在38例儿童肝母细胞瘤和瘤旁组织中的表达。将YAP1 siRNA转染人肝母细胞瘤细胞株HepG2后,分别采用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR, RT-qPCR)和蛋白印迹法(western blot)检测YAP1在mRNA和蛋白水平的变化,细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡。
结果YAP1在肝母细胞瘤的细胞核表达率为50.00%(19/38),瘤旁肝组织无表达0.00%(0/21)(χ2=15.49,P<0.01),且其表达水平与患儿的预后呈负相关。β-catenin在肝母细胞瘤的细胞核阳性表达率为52.63%(20/38),瘤旁肝组织不表达(0/21)(χ2=16.72,P<0.01)。YAP1与β-catenin的表达呈正相关。转染siRNA后,HepG2细胞YAP1的mRNA及蛋白表达显著低于对照组,细胞增殖能力下降,凋亡率增高。
结论YAP1在儿童肝母细胞瘤中高表达,并且与患儿的预后呈负相关。YAP1可能与β-catenin共同促进肝母细胞瘤的生长。YAP1可能成为儿童肝母细胞瘤治疗的新靶点。