【摘 要】
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为了进一步探讨提高PRRSV感染靶细胞滴度的有效方法,本研究采用脂质体介导方法,通过G418筛选稳定转染Marc145细胞,并利用单个细胞克隆技术,获得了稳定超表达CD151蛋白和(或)C
【机 构】
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武汉市农科院畜牧兽医科学研究所; 武汉市重大动物疫病防控中心; 华中农业大学农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室;
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(31201938);武汉市科技局项目(2013020705070350-9,-14);武汉市农业科学院创新项目(CX201309);武汉市农业科学院青年英才项目(YC201101)
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为了进一步探讨提高PRRSV感染靶细胞滴度的有效方法,本研究采用脂质体介导方法,通过G418筛选稳定转染Marc145细胞,并利用单个细胞克隆技术,获得了稳定超表达CD151蛋白和(或)CD163蛋白的Marc145细胞株,经免疫荧光化学和Western Blot鉴定证实,成功表达出基因重组猪CD151蛋白和CD163蛋白。在GMP生产车间将超表达CD151、CD163蛋白或CD151/CD163蛋白共表达的Marc145细胞感染PRRSV,使病毒感染滴度提高了10倍以上。将上述收获的病毒液制备了灭活苗,疫苗效力超过部颁标准。
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