CX43基因慢病毒载体的构建与鉴定

来源 :中国医师进修杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:niannian827
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的

构建间隙连接蛋白43(CX43)过表达载体,并对其进行鉴定。

方法

用内切酶EcoRI、XbaI双酶切含目的基因的质粒和慢病毒载体,将目的基因与酶切线性化的慢病毒载体进行连接,构建重组慢病毒表达载体pHBLV-CMVIE-IRES-ZsGreen- CX43;将构建的载体先进行酶切鉴定再对其测序分析,对测序正确的重组载体和包装质粒共同转染293FT细胞,进行病毒包装和生产,收集浓缩病毒液后在293FT细胞中测定病毒滴度,并采用实时定量聚合酶链反应(PCR)对CX43基因表达进行鉴定。

结果

酶切鉴定和测序分析均证明CX43慢病毒载体构建成功,包装慢病毒,收集浓缩后滴度为1 × 108/ml,实时定量PCR鉴定CX43基因在293FT细胞的表达明显增加。

结论

成功构建了稳定过表达CX43的慢病毒载体。

其他文献
目的 探讨消毒供应室对手术腔镜器械质量控制方法与效果.方法 回顾分析我院消毒供应室手术腔镜器械采取质量管理前后的管理效果.结果 质量控制管理措施应用后较应用前对应的
Objective:To isolate marine bacteria, statistically optimize them for maximum asparaginase production. Methods:In the present study, statistically based experim
我国正在大力推广以“新房舍、新设备、新环境、新农民、新风尚”为特点的新农村建设,村民的健康教育也成了建设新农村任务的一个重要部分.新农村卫生服务是以新农村为范围,
期刊
目的研究C57BL/6小鼠形觉剥夺性近视形成和恢复期视网膜Pax6 mRNA表达及其启动子区域CpG岛甲基化水平的变化情况。方法实验研究。采用单眼形觉剥夺(MD)建立C57BL/6小鼠近视动物模型和恢复期动物模型,将入选的小鼠按随机数字表法分为:MD 4周实验组(12只)、同龄对照组(12只);MD 4周再恢复1周实验组(6只)、同龄对照组(NC,6只)。实验前后分别用红外偏心摄影验光仪检测小鼠眼
目的:分析采用不同手术治疗方法治疗异位妊娠患者所产生的临床治疗效果的差异状况.方法:对我院妇产科2016年08月到2018年08月收治的108例异位妊娠患者的临床数据资料进行收集
There are several cofactors which affect body iron metabolism and accelerate iron overload. Alcohol and hepatic viral infections are the most typical examples f
目的观察健康成年人和稳定期慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者的潮气呼吸流速-容积曲线(TBFV)各参数的变化特征。方法15例无吸烟史的健康成年人(健康对照组)及15例稳定期COPD患者(COPD组)纳入研究,COPD组受试前8h内未用过平喘药物。两组均接受坐位常规肺通气功能和TBFV测定,同步监测口腔压力变化。结果COPD组肺活量占预计值百分比(VC%)、第1秒用力呼气容积(FEV1)占预计值百分比
Pulmonary sequestration is a rare congenital anomaly in the veterinary literature. This malformation is characterized by a cystic mass of non-functioning primit
目的 探究孕妇妊娠不同时期血浆D-二聚体和凝血四项变化、检验价值.方法 选取某院行常规体检的246例孕妇作为研究对象.统计分析所有孕妇妊娠早期、中期、后期及临产前行血浆D
非甾体类抗炎药(NSAIDs)是贯穿于癌痛三阶梯镇痛治疗的基础药物.研究发现,最大剂量的NSAIDs单次给药的镇痛作用与5~10mg吗啡静脉注射相当,对晚期癌症患者骨转移疼痛、软组织转
期刊