大鼠RVLGcDNA的克隆、原核表达和小鼠抗RVLG蛋白多克隆抗体的制备

来源 :生物工程学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:eworld5008
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为了识别大鼠卵巢中的生殖细胞,在原核系统中表达和纯化RVLG蛋白并制备了多克隆抗体。采用RT-PCR方法从大鼠睾丸组织中扩增获得RVLGcDNA片段,然后克隆到pMD19-T载体上进行测序,经双酶切回收目的基因片段后,将其插入到原核表达载体pGEX-4T-1上,转入大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达。纯化后的GST-RVLG融合蛋白免疫昆明(KM)小鼠,最后给小鼠腹腔注射S180细胞制备抗RVLG腹水多克隆抗体。用Westernblotting及免疫组织化学法鉴定RVLG腹水多克隆抗体的特异性,问接EL
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