【摘 要】
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黄热疫苗是一种减毒的黄热病毒17D（YF-17D）活疫苗，是现有疫苗中最安全、最有效的疫苗之一，适于发展为疫苗载体。用RT-PCR法扩增出覆盖YF-17D全长基因组的3个cDNA片段：5’cDNA（A）、3
【机 构】
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北京东方天甲科技发展有限公司,天甲丽珠生物科技有限公司,霍华德大学医学院
【基金项目】
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华瀚生物制药控股有限公司和丽珠医药生物科技有限公司资助.
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黄热疫苗是一种减毒的黄热病毒17D（YF-17D）活疫苗，是现有疫苗中最安全、最有效的疫苗之一，适于发展为疫苗载体。用RT-PCR法扩增出覆盖YF-17D全长基因组的3个cDNA片段：5’cDNA（A）、3’cDNA（B）和中间cDNA（C），同时引入SP6增强子序列、酶切位点和重复序列。顺序将A和B同E．coli-yeast穿梭质粒pRS424连接，再与C共转染酵母菌，利用缺少色氨酸和尿嘧啶的选择性固体培养基筛选出含YF-17D全长基因组的cDNA质粒。以该质粒为模板，经过DNA重组和酵母同源重组，获得
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