猪生殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白nsp4基因的表达及其产物的纯化

来源 :中国兽医科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sunyulong378
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根据GenBank中已登录的猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)全基因组序列,设计合成了1对特异性引物,对PRRSV非结构蛋白nsp4基因进行了RT-PCR扩增,将回收的目的基因片段克隆到大肠埃希氏菌表达载体pET28a中,构建了重组质粒pET-nsp4,测序结果证实了重组质粒pET-nsp4的可靠性。将pET-nsp4转化至大肠埃希氏菌表达菌株BL21(DE3),用IPTG诱导表达,SDS-PAGE结果表明,重组菌可表达分子质量约23ku的蛋白。经镍离子亲和层析柱(Ni-NTA)纯化,获得了高纯度的重组
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