呋喃西林代谢物半抗原的制备及其免疫检测中的应用

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本研究为了克服现有 SEM 半抗原结构不含硝基端基团的不足,将 SEM 与 4-(3-醛基-4-硝基-苯氧基)-丁酸衍生制备半抗原,保留了硝基端基团。然后,将制备的半抗原分别与 BSA 和 OVA 偶联制备 SEM-BSA 免疫原和 SEM-OVA 包被原。免疫原免疫BALB/C 小鼠后,结合细胞融合技术制备单克隆抗体,并利用间接竞争酶联免疫分析法(ci ELISA)评价单克隆抗体的效价及特异性。结果显示,单克隆抗体可特异性识别 SEM 的 2-硝基苯甲醛衍生物(2-NPSEM),效价达 1:2560000。应用 ci ELISA 检测法,在 0.05~4.05 μg/L 呈线性关系,检测限高达 0.04 μg/L,IC50值为 0.23 μg/L,与结构类似物 NPAMOZ、NPAOZ 和 NPAHD 的交叉反应率分别为 0.03%、0.02%和 0.26%。本论文提供的 SEM 半抗原的设计和改造方法,为呋喃西林的代谢物 SEM 的高效检测提供了新思路和方法。
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