【摘 要】
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目的 观察血管内皮细胞培养上清对肝癌细胞Hep3B增殖及侵袭转移能力的影响,探讨肿瘤微环境中内皮细胞在肝癌发生、发展中的作用.方法 以人脐静脉内皮细胞(HUVEC)培养上清为条件培养液(CM),以内皮细胞培养液(EBM)为对照组,分别对Hep3B细胞进行干预.观察其对肝癌细胞Hep3B增殖、迁移和侵袭能力的影响,并检测相关信号通路分子.结果 与对照细胞比较,细胞计数试剂盒-8(CCK-8)实验结果
【机 构】
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200032上海,复旦大学附属肿瘤医院介入治疗科复旦大学上海医学院肿瘤学系,复旦大学附属中山医院肝癌研究所教育部癌变与侵袭重点实验室,200032上海,复旦大学附属肿瘤医院介入治疗科复旦大学上海医学院
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目的 观察血管内皮细胞培养上清对肝癌细胞Hep3B增殖及侵袭转移能力的影响,探讨肿瘤微环境中内皮细胞在肝癌发生、发展中的作用.方法 以人脐静脉内皮细胞(HUVEC)培养上清为条件培养液(CM),以内皮细胞培养液(EBM)为对照组,分别对Hep3B细胞进行干预.观察其对肝癌细胞Hep3B增殖、迁移和侵袭能力的影响,并检测相关信号通路分子.结果 与对照细胞比较,细胞计数试剂盒-8(CCK-8)实验结果显示CM促进肝癌细胞的增殖(P＜0.01);细胞划痕实验和迁移实验也分别显示CM明显促进肝癌细胞迁移能力[(33.65±1.22)％比(57.85±2.20)％,P ＜0.01;(51.2±3.1)个比(28.4±4.6)个,P＜0.01];侵袭实验显示CM明显诱导肝癌细胞侵袭能力[(16.2±2.3)个比(5.4±1.5)个];同时CM干预的肝癌细胞侵袭转移相关基因,如基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、骨桥蛋白(OPN)和簇分化抗原44(CD44)表达及丝氨酸/酪氨酸激酶(Akt)和细胞外信号调节激酶(ERK)蛋白磷酸化水平均被明显上调.结论 血管内皮细胞培养上清体外促进肝癌细胞增殖、迁移和侵袭转移,提示血管内皮细胞可通过旁分泌机制参与肝癌侵袭转移过程。
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