抗人黑色素瘤单链抗体基因的克隆和分泌型表达

来源 :中国生物化学与分子生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chen_chen1111
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应用RT-PCR技术从分泌抗人黑色素瘤单克隆抗体的杂交瘤细胞HB8760中克隆了抗体轻、重链可变区基因,然后用(Gly4Ser)3连接肽基因将VH、VL连接成ScFv基因,并进行了序列测定.计算机分析表明VH,VL均符合小鼠抗体可变区的特征,为功能性重排的抗体可变区基因.VH、VL、linker拼接正确.ScFv基因全长729bp,其中VH基因长360bp,编码120个氨基酸,VL基因长324bp,编码108个氨基酸.在噬菌粒表达载体pCANTAB5E中表达了可溶性的ScFv蛋白,表达产物经流式细胞仪检测
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