【摘 要】
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目的较高效率分泌表达大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位并鉴定其性质.方法将编码成熟大肠杆菌不耐热肠毒素(LTB)的基因引入pET22b(+)并转化E.coli BL21(DE3);重组工程菌在改良M9-
【机 构】
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第三军医大学临床微生物学教研室,第三军医大学临床微生物学教研室
【基金项目】
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国家重点科技计划项目 (96 90 1 0 1 54);“863”生物与现代农业技术领域生物工程技术主题课题 (2 0 0 1AA2 1 51 61 )资助
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目的较高效率分泌表达大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位并鉴定其性质.方法将编码成熟大肠杆菌不耐热肠毒素(LTB)的基因引入pET22b(+)并转化E.coli BL21(DE3);重组工程菌在改良M9-CAA培养基内进行表达;对分泌表达的LTB进行纯化后进行神经节苷脂(GM1)结合活性、免疫原性与黏膜免疫佐剂活性的鉴定.结果LTB既能分泌表达至胞周质又能以包含体形式表达,两者都与pelB信号肽准确分离.纯化出的LTB具有正常的GM1结合活性、免疫原性及黏膜免疫佐剂活性.结论pET22b(+)质粒的pelB信号肽
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