探讨α-黑素细胞刺激素(α-MSH)对高糖高脂刺激下视网膜血管内皮细胞中mRNA及长链非编码RNA(lncRNA)表达的影响。
方法对恒河猴视网膜血管内皮细胞系(RF/6A)进行培养，将细胞分为正常对照组、模型对照组、0.1 μmol/L α-MSH处理组、0.5 μmol/L α-MSH处理组和1.0 μmol/L α-MSH处理组。各组细胞进行CM-H2DCFDA染色，检测细胞抗氧化能力，筛选α-MSH的最佳工作浓度。正常对照组、模型对照组和α-MSH处理组细胞处理后24 h，收集各组细胞提取总RNA，经高通量RNA测序(RNA-seq)构建RNA测序文库并进行生物信息学分析。
结果0.5 μmol/L α-MSH组细胞荧光强度明显低于模型对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，选择0.5 μmol/L为α-MSH的最佳作用浓度并进行后续实验。RNA-seq结果显示，与模型对照组相比，α-MSH处理组中243个mRNAs表达下调，81个mRNAs表达上调，53个lncRNAs表达上调，6个lncRNAs表达下调。生物信息学分析结果显示，α-MSH处理组表达下调的基因中主要富集的通路包括转化生长因子-β(TGF-β)信号通路、局部黏附通路和细胞外基质(ECM)受体相互作用通路，主要参与的生物过程为调节小三磷酸鸟苷酶(small GTPase)介导的信号转导。α-MSH处理组中表达上调的共表达lncRNA主要富集通路包括ECM受体互作通路、缺氧诱导因子-1(HIF-1)通路等，主要参与轴突导向、RNA聚合酶Ⅱ启动子转录的正向调节等生物过程。
结论α-MSH处理后，高糖、高脂刺激的视网膜血管内皮细胞主要表现为lncRNA表达上调及mRNA表达下调，提示α-MSH可能通过上调lncRNA的表达来下调下游基因的mRNA表达。