【摘 要】
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本实验根据已发表的丝状支原体丝状亚种SC型脂蛋白Q(LppQ)基因序列设计并合成一对引物,利用PCR扩增方法,从我国不同省区的MmmSC分离株X、Ben I、Qing I、Mu I和模式株PG1中获得了LppQ基因1303bp的片段,将该片段克隆到PMD18-T载体上,通过对所得到的重组质粒进行酶切分析、PCR鉴定,证明得到了含有目的基因片段的阳性重组质粒.采用Sangers双脱氧末端终止法对插入
【机 构】
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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所国家牛传染性胸膜肺炎参考实验室(黑龙江哈尔滨)
【出 处】
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中国畜牧兽医学会2004年学术年会暨第五届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会
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本实验根据已发表的丝状支原体丝状亚种SC型脂蛋白Q(LppQ)基因序列设计并合成一对引物,利用PCR扩增方法,从我国不同省区的MmmSC分离株X、Ben I、Qing I、Mu I和模式株PG1中获得了LppQ基因1303bp的片段,将该片段克隆到PMD18-T载体上,通过对所得到的重组质粒进行酶切分析、PCR鉴定,证明得到了含有目的基因片段的阳性重组质粒.采用Sangers双脱氧末端终止法对插入片段进行核苷酸序列测定,获得了X、Ben I、Qing I、Mu I和模式株PG1株LppQ基因核苷酸序.核苷酸序列比较结果显示,国内4个MmmSC分离株与GeneBank公布的LppQ基因核苷酸序列同源性均在99.7﹪以上,氨基酸序列同源性均在99﹪以上;与模式株PG1的核苷酸序列同源性在99.7﹪以上,氨基酸序列同源性均在99.3﹪以上.国内4个MmmSC分离株之间的核苷酸序列同源性均在99.7﹪以上,氨基酸序列同源性均在99.3﹪以上.通过对MmmSC LppQ-CH1蛋白氨基酸亲水性分析证实其N末端较C末端富含亲水氨基酸;蛋白表面可能性预测证实N末端较C末端更有可能定位在蛋白表面.
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