【摘 要】
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目的 建立流感病毒滴度蚀斑检测方法,研究其适用性,为基于Vero细胞基质的四价流感裂解疫苗原液生产过程提供质控手段.方法 通过优化覆盖物琼脂糖含量、病毒吸附时间及培养温度等参数,建立蚀斑法检测流感病毒滴度检测的方法,对其进行初步验证,并与鸡胚法进行比较.结果 通过对流感病毒培养条件的优化,确定覆盖物中最佳琼脂糖终浓度为1.0％(P=0.001,P＜O.05)、最佳吸附时间为90 min(P=0.001,P＜O.05),与对照差异具有统计学意义;不同温度(33℃、35℃和37℃)培养条件对病毒滴度的影响差异
【机 构】
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辽宁成大生物股份有限公司研发部,辽宁沈阳110179
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目的 建立流感病毒滴度蚀斑检测方法,研究其适用性,为基于Vero细胞基质的四价流感裂解疫苗原液生产过程提供质控手段.方法 通过优化覆盖物琼脂糖含量、病毒吸附时间及培养温度等参数,建立蚀斑法检测流感病毒滴度检测的方法,对其进行初步验证,并与鸡胚法进行比较.结果 通过对流感病毒培养条件的优化,确定覆盖物中最佳琼脂糖终浓度为1.0％(P=0.001,P＜O.05)、最佳吸附时间为90 min(P=0.001,P＜O.05),与对照差异具有统计学意义;不同温度(33℃、35℃和37℃)培养条件对病毒滴度的影响差异无统计学意义(P＞0.05).对病毒液重复性试验结果显示,由同一组试验人员连续测定8次,CV在3.73％～7.04％之间;同一组试验人员在不同工作日内对3批甲型(H3N2)病毒液测定,CV在3.46％～4.12％之间;不同试验人员测定结果的CV在1.77％～5.63％之间.表明蚀斑法重复性好、准确度高.蚀斑法与鸡胚法检测病毒滴度分别为7.84 lgPFU/mL和7.24 lgEID5o/mL,CV分别为2.90％(＜5％)和10.21％.蚀斑法在流感病毒2017-2018年流行株病毒滴度检测中应用,均获得稳定的检测结果.结论 建立的蚀斑法简便、稳定且灵敏度高,能够准确地检测流感病毒的滴度,可用于流感疫苗生产过程的质量控制研究.
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