【摘 要】
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目的 探讨通过体外扩增乙肝表面抗原(HBsAg)基因,构建真核表达载体pcDNA3-HBsAg-ROP2的可行性.方法 根据乙肝S基因序列及pcDNA3-p30-ROP2酶切位点等情况设计、合成引物,应用
【机 构】
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山东省医学科学院,济宁市第一人民医院
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目的 探讨通过体外扩增乙肝表面抗原(HBsAg)基因,构建真核表达载体pcDNA3-HBsAg-ROP2的可行性.方法 根据乙肝S基因序列及pcDNA3-p30-ROP2酶切位点等情况设计、合成引物,应用聚合酶链反应(PCR)技术,扩增HBsAg基因片段;应用回收、纯化、酶切、连接等技术,将HBsAg基因替换pcDNA3-p30-ROP2中的p30基因,并进行酶切、PCR扩增及测序鉴定.结果 PCR扩增出约0.7 kb的目的 基因HBsAg,成功构建pcDNA3-HBsAg-ROP2重组载体.PCR、酶切结果与理论相符,重组体包含了HBsAg和ROP2基因的完整序列.结论 利用体外扩增乙肝表面抗原,可成功构建乙肝和弓形虫多功能重组载体pcDNA3-HBsAg-ROP2.
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