低氧诱导因子-1α介导的微小RNA-210对胃癌细胞增殖与转移功能的影响及机制

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目的

观察低氧微环境对胃癌细胞增殖、转移功能的影响,并探讨其相关的分子学机制。

方法

细胞增殖检测试剂盒(CCK-8)、Transwell法检测SGC-7901细胞经低氧处理后的增殖、迁移及侵袭能力,应用高通量测序(Illumina Hiseq)对低氧处理后的微小RNA(miRNA,miR)差异基因进行检测;实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)法、干扰低氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达法验证低氧环境下HIF-1α诱导miR-210的能力;后在正常胃黏膜组织、胃癌及癌周组织中检测miR-210的表达,分析其表达量与患者临床病理学特征之间相关性;接下来进一步在体外上调/抑制miR-210后,应用CCK-8、Transwell检测miR-210对胃癌细胞株AGS、SGC-7901增殖、迁移及侵袭能力的影响;后应用生物信息分析、报告基因实验、蛋白质免疫印迹(Western blot)及靶基因干扰实验探讨其发挥功能的具体分子学机制。两组间比较采用t检验。

结果

与常氧组比较,低氧可明显促进SGC-7901细胞的增殖(0.43±0.13比0.56±0.17,t=5.43,P

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