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目的
构建1株基于Vero细胞高产的H7N9亚型流感病毒疫苗候选株,为应对人感染H7N9病毒提供细胞介质的疫苗候选株。
方法利用流感病毒反向遗传学技术,将H7N9亚型流行株的HA和NA基因与高产疫苗骨架株PR8-4mut的6条编码病毒内部蛋白的基因,通过6∶2重组法拯救出4mut-H7N9病毒。通过病毒学方法检测病毒在Vero细胞上的生长性状和病毒蛋白产量。
结果4mut-H7N9病毒在Vero细胞上生产速度更快,可收获更多的病毒蛋白。同时,4mut-H7N9病毒没有改变胰酶依赖性,并保持在小鼠中的低致病性,保证了该高产疫苗候选株的安全性。
结论通过6∶2重组法,以反向遗传学技术构建的4mut-H7N9疫苗候选株能够极大地提高病毒在Vero细胞中的增殖速度,可作为以Vero细胞为生产介质的H7N9高产疫苗备选株。