一种通用循环免疫复合物抗体解离技术的建立及应用评价

来源 :中国免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:JESSEA11
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目的:建立一种通用循环免疫复合物(CIC)抗体解离技术,并评价其应用价值。方法:采用已建立的聚乙二醇(PEG)二次沉淀分离技术对标本中的CIC进行高效分离,然后运用Gly-HCl缓冲系统和正交设计方法对HBs Ag-IC中的anti-HBs解离实验条件进行优化选择,建立通用的CIC抗体解离技术,并对其方法学性能及应用进行初步评价。结果:HBs Ag-IC中anti-HBs的最佳解离条件为:CIC抗体解离剂p H1. 80,15℃解离5~10 min,振荡频率>60次/min,加入CIC抗体中和剂后10min内测定;该技术对HBs Ag-IC的anti-HBs平均解离率为64. 3%,重现性<5. 97%,线性良好(r=0. 993 2),平均回收率95. 4%,特异性100%,试剂稳定性均>12个月; HCV-IC、HIV-IC、Ins-IC、TG-IC的解离条件与HBs Ag-IC基本相同,但CIC中抗体解离率有差异;该技术对不同HBV-M模式HBs Ag-IC中的anti-HBs含量和检出率具有统计学差异(P<0. 05),对HCV-IC、HIV-IC、INS-IC、TG-IC中的相应抗体检出率分别为34. 8%、66. 7%、20. 0%、14. 3%。结论:CIC抗体解离技术是一种通用前处理技术,它能够对多种CICs进行沉淀、分离、解离后直接测定抗体,具有一定的应用价值。
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