【摘 要】
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目的 构建人GM-CSF基因的重组腺病毒载体,探讨其在树突状细胞（DC）中的表达.方法 设计一对GM-CSF基因上下游引物,以质粒pBlu-hGM-CSF为模板,经PCR扩增获得GM-CSF基因全部序列.片
【机 构】
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福建医科大学附属协和医院、福建省血液病研究所,福建医科大学分子医学研究中心,福建医科大学附属泉州市第一医院血液科
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目的 构建人GM-CSF基因的重组腺病毒载体,探讨其在树突状细胞（DC）中的表达.方法 设计一对GM-CSF基因上下游引物,以质粒pBlu-hGM-CSF为模板,经PCR扩增获得GM-CSF基因全部序列.片段回收后经酶切,定向插入腺病毒穿梭质粒,获得重组质粒pshuttle-CMV-GM-CSF.经双酶切、PCR及插入片段测序鉴定后,将正确重组体转化包含腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的BJ5183菌.同源重组后用选择性培养基筛选阳性克隆,提取质粒,将2种重组腺病毒质粒分别进行酶切、线性化、纯化,用脂质体
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