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结核分枝杆菌Ag85A／MPT-64融合基因DNA疫苗的构建及免疫研究中ELISPOT技术的应用

来源 :中国实验诊断学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：bqrxbqrx
【摘 要】
：
目的构建结核分枝杆菌蛋白Ag85A／MPT-64融合基因为基础的DNA疫苗，并利用ELISPOT技术检测其免疫原性。方法利用PCR和基因克隆技术从结核分枝杆菌H37Rv基因组中扩增出Ag85A／MPT-64
【作 者】
：
张娟 蒋俊 张红 马龙凤 包洪 于庭 
【机 构】
：
沈阳市胸科医院,吉林大学第二医院
【出 处】
：
中国实验诊断学
【发表日期】
：
2012年1期
【关键词】
：
结核分枝杆菌 AG85A MPT-64 DNA疫苗 ELISPOT Mycobacterium tuberculosis Ag85 A MPT-64 DN 
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目的构建结核分枝杆菌蛋白Ag85A／MPT-64融合基因为基础的DNA疫苗，并利用ELISPOT技术检测其免疫原性。方法利用PCR和基因克隆技术从结核分枝杆菌H37Rv基因组中扩增出Ag85A／MPT-64编码基因，构建真核表达载体，用酶切和双向DNA测序进行鉴定。鉴定正确的阳性克隆重组质粒，肌注免疫小鼠，3周后用ELISPOT法检测抗体滴度。结果构建到真核载体中的结核分枝杆菌H37Rv株Ag85A／MPT-64融合基因经序列测定证实无突变。ELISPOT法检测几何平均滴度为1：1000。结论以Ag85A
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