【摘 要】
：
目的·探究不同Kirsten大鼠肉瘤病毒癌基因(Kirsten rat sarcoma viral oncogene,KRAS)突变型非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者肿瘤组织及细胞系与程序性
【机 构】
：
上海交通大学医学院附属瑞金医院老年病科,上海200025;上海交通大学医学院附属瑞金医院呼吸与危重症科,上海200025
论文部分内容阅读
目的·探究不同Kirsten大鼠肉瘤病毒癌基因(Kirsten rat sarcoma viral oncogene,KRAS)突变型非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者肿瘤组织及细胞系与程序性死亡蛋白配体1(programmed cell death ligand 1,PD-L1)表达的关系及其可能的调控机制.方法·通过实时荧光定量PCR和荧光活化细胞分选法,在NSCLC细胞系中验证PD-L1mRNA和蛋白的表达与KRAS突变状态的关系.通过免疫组织化学法检测77例早期(Ⅰa～Ⅱb期)NSCLC患者肿瘤组织中PD-L1的表达情况.通过Western blotting研究KRAS突变对RAS下游信号通路分子蛋白激酶B(protein kinase B,PKB,又称为AKT)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)、核糖体 S6蛋白激酶(ribosomal S6 protein kinase,p70S6K)、细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinase,ERK)的影响.用 RAF抑制剂达拉非尼、有丝分裂原活化蛋白激酶(mitogen activated-protein kinase,MEK)抑制剂司美替尼、磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂GDC0941、AKT抑制剂MK2206和mTOR抑制剂雷帕霉素分别处理6个KRAS突变NSCLC细胞株,检测这5种酪氨酸激酶抑制剂对PD-L1表达的调控作用.结果·在NSCLC细胞系中,KRAS突变细胞系的PD-L1 mRNA和蛋白的表达水平均显著高于KRAS野生型细胞系(均P＜0.05),且KRAS G12V细胞系PD-L1的mRNA表达水平最高,KRASG12C细胞系PD-L1的蛋白表达水平最高.对于早期NSCLC患者,PD-L1在KRASG12V和G12D突变型患者肿瘤组织中高表达的比例显著高于KRAS野生型.Western blotting结果显示,KRAS突变NSCLC细胞系中,p70S6K被激活,而ERK、AKT、mTOR未被激活.进一步研究发现,1 μmol/LGDC0941、0.5μmol/L MK2206和10 nmol/L雷帕霉素均未对6个KRAS突变NSCLC细胞株的PD-L1表达产生影响,5nmol/L达拉非尼仅在1个KRASG12V突变株和1个KRASL19F突变株引起PD-L1表达上调(均P＜0.05),而0.1 μmol/L司美替尼在3个KRASG12V突变株和1个KRASL19F突变株引起PD-L1表达下调(均P＜0.05),且呈一定剂量依赖性.结论·KRAS突变,尤其是G12V突变型的NSCLC细胞或组织的PD-L1表达水平明显高于KRAS野生型;司美替尼可下调KRAS G12V突变型NSCLC细胞的PD-L1水平,推测KRAS G12V突变的NSCLC细胞可能通过上调MEK上调PD-L1的表达.
其他文献
百日咳是由百日咳杆菌引起的严重急性呼吸道传染病,病情重、并发症多。儿童,特别是未完成免疫接种的低龄儿是百日咳的易感人群[1]。据WHO数据显示,2019年全球约132754例患者感染百日咳,2008年估算病死约89000例[2]。多项国外多中心研究[3-4]结果均提示,高白细胞血症为重症百日咳患儿死亡的重要危险因素。国内儿童百日咳诊断建议[5]中指出,对于0~3月龄的婴儿,当白细胞(white blood cell,WBC)计数≥20×109/L时即提示高白细胞血症。
目的·分析急性淋巴细胞白血病(acute lymphocytic leukemia,ALL)儿童治疗失败的原因,探讨减少治疗失败的策略。方法·回顾性研究2006年1月至2017年6月于上海市儿童医院初诊的330例ALL患儿中的治疗失败者,分析其治疗失败的原因;并按不同原因分别分析这些患儿的临床特征。采用Kaplan-Meier生存曲线及COX回归模型分析患儿的复发率、复发患儿的总生存(overall survival,OS)率及影响复发的危险因素;采用χ2检验分析不同危险度患儿感染出
目的通过深入访谈了解孕晚期妇女实施会阴按摩的情况及阻碍因素,以期减少分娩时会阴损伤和促进产妇产后盆底康复。方法选取2018年11月至2019年3月就诊于复旦大学附属妇产科医院助产士门诊并接受会阴按摩宣教的10名孕产妇为研究对象,围绕会阴按摩实施体验对其进行半结构式深度访谈,采用Colaizzi描述性现象学研究法进行资料分析。结果根据访谈内容,提炼出阻碍孕晚期妇女实施会阴按摩的3个主题:缺乏会阴按摩的相关知识和技能,在实施过程中存在实际困难,以及孕产妇主观重视不足。结论医务人员可通过采取针对性、多样化的宣教
目的·采用加权基因共表达网络分析(weighted gene co-expression network analysis,WGCNA)探索抑郁症相关的差异基因模块及其枢纽基因,并对差异基因模块进行生物功能注释。方法·在之前对8例抑郁症患者及8名健康对照者(对照组)的外周血mRNA微阵列分析实验的基础上,应用t检验筛选抑郁症患者与对照组的差异表达基因,通过R软件WGCNA包进行分析;当关联系数阈值设定为0.9时,参数β=14,以此构建基因数据集的共表达网络。应用混合动态树切割方法切割网络产生基因模块。采用
目的探讨专科医护团队主导的微信小组互动管理对出院精神分裂症患者疾病恢复及其亲属情绪的影响。方法选取2018年3—12月在上海市金山区精神卫生中心确诊且出院的111例精神分裂症患者及其亲属为研究对象,将其随机分为对照组(n=55)和观察组(n=56)。对照组给予常规健康宣教、心理支持和定期随访,观察组在此基础上接受由专科医护团队主导的微信小组互动管理,根据随访时间将患者及家属分为4个小组并对应建立微信群进行互动管理。于患者出院时以及出院3个月、6个月和9个月4个时间点,分别评估比较两组患者的服药依从性、病情
全氟化合物(perfluorinated compounds,PFAS)是一类近年来受到广泛关注的新型持久性有机污染物.随着欧美国家对其限制的法律法规增多,PFAS的生产逐渐向中国转移,其使用量逐年
丙酸血症是常染色体隐性遗传的有机酸血症。除生长发育障碍和中枢神经系统损伤外,其最主要的中远期并发症,同时也是常见的致死原因,包括扩张型心肌病和心律失常(长Q-T间期综合征和心室颤动等)。心血管受累的机制包括丙酸等代谢产物过量引起心肌细胞线粒体能量代谢紊乱、氧化应激损伤和离子通道受损等。目前尚无公认的丙酸血症心肌病治疗指南。有观点认为,肝脏移植可以纠正代谢紊乱从而逆转心肌病变,而抗氧化剂和提高心肌能量供应的药物有望成为未来丙酸血症心肌病的治疗方案。
目的 探讨照顾者参与的安全饮食管理在脑卒中吞咽障碍患者中的应用效果.方法 以2018年1月至2019年12月收治于江苏省如东县中医院的初发脑卒中且伴有3～4级吞咽障碍的患者作为研
本文总结了2例新冠病毒核酸转阴患者肺移植术的手术室防控经验。手术室从术前准备、术中防控、术后处置这3方面,通过多个职能部门协调合作,从人力资源安排、物资对接管理、重点环节防控等方面,阐述了新冠肺炎患者肺移植手术室防控管理,以期为临床相关人员提供参考。
肺癌细胞的干性及耐药性是重要的恶性指标。ATP结合盒蛋白G超家族成员2(ATP-binding cassette superfamily G member 2,ABCG2)是细胞表面的ATP结合盒蛋白家族的成员之一,依赖ATP可将药物排到细胞外。ABCG2定位于人多种肿瘤细胞的膜上,它的表达与肿瘤化学治疗多药耐药性紧密相关,目前被认为是肺癌干细胞鉴定的辅助群体标志物。此外,ABCG2的一些单核苷酸多态性与肺癌多药耐药性存在显著相关性。该文就最新ABCG2相关研究进展进行总结和归纳,重点介绍ABCG2基因的