柔嫩艾美耳球虫乳酸脱氢酶真核表达质粒的构建与鉴定

来源 :中国动物传染病学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：yao_huaxin

【摘要】

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为构建柔嫩艾美耳球虫乳酸脱氢酶(Eimeria tenella Lactate dehydrogenase,EtLDH)的真核表达质粒,分别以柔嫩艾美耳球虫第二代裂殖子和鸡脾脏cDNA为模板,PCR扩增出EtLDH和鸡I

【作者】

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王艳歌董辉韩红玉赵其平朱顺海李榴佳吴有陵黄兵

【机构】

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中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点实验室

【出处】

：

中国动物传染病学报

【发表日期】

：

2014年2期

【关键词】

：

柔嫩艾美耳球虫乳酸脱氢酶 IFN-Γ基因 293T细胞真核表达 Eimeria tenella lactate dehydrogenase IFN-γ

【基金项目】

：

国家自然科学基金(31272557)

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为构建柔嫩艾美耳球虫乳酸脱氢酶(Eimeria tenella Lactate dehydrogenase,EtLDH)的真核表达质粒,分别以柔嫩艾美耳球虫第二代裂殖子和鸡脾脏cDNA为模板,PCR扩增出EtLDH和鸡IFN-γ基因,PCR产物经酶切回收目的片段后与相应酶切的真核表达载体pCAGGS连接,构建了真核表达质粒pCAGGS-EtLDH和pCAGGS-EtLDH-IFN-γ。所构建的真核表达质粒经酶切和测序鉴定为正确后转染293T细胞进行表达,分别用Western blot和间接免疫荧光鉴定Et

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