【摘 要】
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目的:为了减化操作过程,减少药品对操作人员有直接或间接危害,提高农杆菌质粒DNA的产率和实验结果的稳定性。方法:对常规碱裂解法进行了改动,改进的方法通过加大菌液的收集量
【机 构】
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湖北师范学院生物系,中国农业科学院生物技术所基因工程实验室
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目的:为了减化操作过程,减少药品对操作人员有直接或间接危害,提高农杆菌质粒DNA的产率和实验结果的稳定性。方法:对常规碱裂解法进行了改动,改进的方法通过加大菌液的收集量,利用LiCl沉淀RNA,简化操作流程和严格反映环境条件,并且在操作过程中去除了酚、氯仿等对人体有害的试剂。结果:提取时间缩短,结果稳定,产率在1.5μgμL以上。结论:用这种方法提取的质粒可以满足大多数分子生物学常规实验如DNA的酶切、PCR鉴定的要求。
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