【摘 要】
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目的 观察补元汤对慢性阻塞性肺疾病(CODP)患者血清处理条件下的大鼠骨骼肌细胞自噬的影响并探讨其潜在的分子机制.方法 取健康SD大鼠骨骼肌组织,分离培养纯化并传代,随机分
【机 构】
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建德市中西医结合医院,浙江建德311612
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目的 观察补元汤对慢性阻塞性肺疾病(CODP)患者血清处理条件下的大鼠骨骼肌细胞自噬的影响并探讨其潜在的分子机制.方法 取健康SD大鼠骨骼肌组织,分离培养纯化并传代,随机分为5组.除空白组外各组,采用COPD患者血清诱导大鼠骨骼肌细胞建立COPD骨骼肌损伤模型,2个治疗组予不同浓度补元汤含药血清进行干预,自噬抑制组细胞则加入自噬抑制剂3-MA,运用RT-PCR、Western Blot、荧光显微摄片技术观察评估COPD微环境中Myostatin介导的信号通路中信号因子、自噬相关蛋白的表达水平及自噬小体的分布情况.结果 MDC染色下模型组及两个中药干预组荧光点数量多于自噬抑制剂组,而空白组荧光点密度较低.自噬相关蛋白LC3及通路蛋白MSTN、Foxo3、Foxo1、Bnip3表达水平为模型组＞低剂量组＞高剂量组＞自噬抑制剂组＞空白对照组,且差异有显著性(P＜0.05);与空白组比较,经COPD患者血清处理48 h后,模型组骨骼肌上述mRNA表达有所升高(P＜0.01),与慢阻肺模型组相比较,含药血清高剂量组和低剂量组MSTN、Foxo3、Foxo1、Bnip3、LC3 Ⅱ/Ⅰ的表达均降低,高剂量组降低更加明显(P＜0.05),且在对Foxo3、Foxo1表达抑制作用上,仍不及3-MA抑制剂组.结论 补元汤在COPD微环境下可能通过抑制自噬来发挥保护骨骼肌细胞功能的作用,其分子机制可能与调控Myostatin信号通路相关蛋白有关.
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