腺病毒介导人卵泡刺激素基因在山羊乳腺上皮细胞的表达及蛋白活性分析

来源 :家畜生态学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:maferhipo
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该研究旨在构建含人FSH基因的重组腺病毒载体,在山羊乳腺上皮细胞中进行表达,验证重组人FSH的体外生物学活性.利用AdEasy重组腺病毒系统获得pAdEasy-FSH/His重组腺病毒载体,经HEK293A细胞包装、扩增后获得重组人FSH腺病毒,感染GMEC后,检测FSH表达情况.结果 表明,将获得的较高滴度的含FSH目的 基因的重组腺病毒感染GMEC后,经Western blot检测GMEC细胞可以成功表达FSH蛋白;通过体外细胞活性试验验证其具备生物学活性.综上所述,腺病毒介导的羊乳腺上皮细胞表达的重组人FSH具备体外生物学活性,这为进一步在大动物乳腺表达重组FSH奠定了基础.
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为了揭示LHCGR基因g.75741060A>C和g.75748150A>G突变与鲁中肉羊产羔数的关系,该研究采用Sequenom MassARRAY(R)SNP检测方法对384只鲁中肉羊LHCGR基因上述2个突变位点进行分型,