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含hIGF-1基因腺病毒的构建及在兔骨髓间充质干细胞的表达

来源 :第三军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：lawyerhw

【摘 要】

：

目的用Adeasy系统构建荧光蛋白基因标记的腺病毒载体Ad-hIGF-1，然后转染兔骨髓间充质干细胞并检测其表达。方法根据GenBank公布的hIGF-1序列设计PCR引物，从质粒pcDNA3．1-hIGF-1

【作 者】

：

丁幸坡 金先庆 罗小辑 邱林 刘伟 

【机 构】

：

重庆医科大学儿童医院外科研究室

【出 处】

：

第三军医大学学报

【发表日期】

：

2006年14期

【关键词】

：

人胰岛素样生长因子-1 腺病毒载体 骨髓间充质干细胞 human insulin-like growth factor  adenovirus vector 

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目的用Adeasy系统构建荧光蛋白基因标记的腺病毒载体Ad-hIGF-1，然后转染兔骨髓间充质干细胞并检测其表达。方法根据GenBank公布的hIGF-1序列设计PCR引物，从质粒pcDNA3．1-hIGF-1中扩增出截短型hIGF-1，亚克隆至pMD-T载体，鉴定后酶切出目的基因插入pAdtrack-CMV中构建成腺病毒穿梭质粒pAdtrack-hIGF-1，经Pme Ⅰ线性化后采用电穿孔法转化至已包含有腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的BJ5183大肠杆菌中，挑选同源重组质粒线性化后转染HEK293细

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