HCV胞膜蛋白E2基因的融合表达、纯化及多克隆抗体制备

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目的原核表达HCV胞膜蛋白E2,获得抗E2多克隆抗体.方法利用PCR方法从HCV基因组序列中扩增出831 bp(384~661aa)的E2基因片段并按读框克隆到原核表达载体pET32a(+),IPTG诱导HCV E2蛋白表达,SDS-PAGE和Western Blot法检测蛋白表达,Ni-NTA偶联的琼脂糖吸附柱纯化融合蛋白,薄层扫描及Bradford 法检测纯化蛋白的纯度>90%;用表达的E2蛋白免疫新西兰兔制备多克隆抗体,利用间接ELISA 法检测抗体效价,Western Blot法检测抗体特异性.结
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