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目的:探讨水通道蛋白9(aquaporin 9,AQP9)参与低氧微环境中肝癌细胞的低氧应答及其可能的作用机制。方法:采用低氧培养箱建立肝癌SMMC-7721和Huh-7细胞的低氧模型。应用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测低氧培养后SMMC-7721和Huh-7细胞中AQP9 mRNA以及Huh-7细胞中AQP9蛋白的表达。将AQP9过表达的重组慢病毒LV-AQP9或空载体慢病毒LV-PWPI感染SMMC-7721和Huh-7细胞后,获得AQP9稳定过表达的SMMC-7721-AQP9和Huh-7-AQP9细胞及其阴性对照SMMC-7721-PWPI和Huh-7-PWPI细胞。CCK-8法和蛋白质印迹法分别检测低氧培养后,SMMC-7721-AQP9、Huh-7-AQP9、SMMC-7721-PWPI和Huh-7-PWPI细胞的增殖及细胞中缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)和磷酸化mTOR(phosphorylated-mTOR,p-mTOR)的表达。结果:低氧环境下,Huh-7细胞中AQP9 mRNA和蛋白的表达水平明显下调(P值均<0.05),SMMC-7721细胞中AQP9 mRNA的表达水平明显下调(P<0.05)。低氧环境下,过表达AQP9对SMMC-7721和Huh-7细胞增殖的抑制作用强于常氧状态(P值均<0.05);SMMC-7721-AQP9和Huh-7-AQP9细胞中HIF-1α和p-mTOR蛋白的表达水平均明显低于SMMC-7721-PWPI和Huh-7-PWPI细胞(P值均<0.05)。结论:低氧微环境中过表达AQP9可能通过下调HIF-1α的表达,抑制人肝癌SMMC-7721和Huh-7细胞的增殖,其增殖抑制作用强于常氧环境。