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探讨细丝蛋白A(FLNa)基因对人胃癌细胞MKN28体外增殖和侵袭的影响及机制。
方法通过脂质体介导的方式将重组质粒载体pcDNA3.1/V5-His-TOPO/FLNa转染到MKN28细胞中，Western blot检测转染后MKN28细胞中FLNa蛋白表达，噻唑蓝(MTT)法检测细胞的体外增殖能力，Transwell法检测细胞的侵袭能力。Western blot检测转染后细胞及对照细胞中细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达。
结果FLNa基因转染到MKN28细胞后，FLNa蛋白水平明显增加(P<0.05)，验证转染成功。MTT结果显示，FLNa转染组在第3、4天的增殖能力明显低于对照组(0.45±0.04比0.62±0.02、0.65±0.03比0.81±0.03，P<0.05)。Transwell细胞侵袭实验显示，FLNa转染组中穿透的细胞数明显少于空转组和对照组[(266±12)个比(405±16)个比(426±13)个，P<0.05]。FLNa转染到细胞后，明显抑制了Cyclin D1和MMP-9的蛋白表达(P<0.05)。
结论FLNa基因具有抑制人胃癌MKN28细胞体外增殖和侵袭作用，其作用机制涉及Cyclin D1和MMP-9的表达下调。