【摘 要】
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目的：从人源单链抗体库中筛选抗B细胞刺激因子（BLyS）的单链抗体基因、构建表达载体并实现单链抗体的表达。方法：以哺乳动物细胞展示型人源ScFv抗体库为起始文库，通过流式细胞术进
【机 构】
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安徽医科大学,军事医学科学院放射与辐射医学研究所
【基金项目】
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国家自然科学基金（81272701）
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目的：从人源单链抗体库中筛选抗B细胞刺激因子（BLyS）的单链抗体基因、构建表达载体并实现单链抗体的表达。方法：以哺乳动物细胞展示型人源ScFv抗体库为起始文库，通过流式细胞术进行分选，获得荧光强度最强、比例为0．1％的阳性细胞。从候选细胞中提取质粒并转化至DH5（x中进行扩增，得到质粒转染293T细胞作为下一轮筛选所需的抗体库。经过依次降低抗原浓度进行了3轮分选得到2个候选的ScFv序列。经序列分析，选择其中一种单链抗体基因，利用基因工程技术构建分泌型表达质粒，转染293E细胞并通过镍亲和层析纯化获得B
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