【摘 要】
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[目的]探索MSS4在缺血再灌注损伤(IRI)大鼠肾脏中的表达情况,以及在缺氧/复氧大鼠肾小管上皮细胞中的作用。[方法]雄性成年SD大鼠随机分为假手术组和IRI组,分别予假手术和肾脏缺血再灌注处理,IRI组给予双侧肾蒂夹闭45 min后再灌注,分别于术后0、12、24、48、72 h收集血液及肾组织标本。自动分析法检测各组大鼠血清肌酐、血清尿素氮水平,肾组织PAS染色评估肾小管损伤情况,蛋白印迹法
【基金项目】
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重庆市教育委员会科学技术研究项目(KJQN202000439); 重庆医科大学附属第三医院科研孵化项目(KY08029);
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[目的]探索MSS4在缺血再灌注损伤(IRI)大鼠肾脏中的表达情况,以及在缺氧/复氧大鼠肾小管上皮细胞中的作用。[方法]雄性成年SD大鼠随机分为假手术组和IRI组,分别予假手术和肾脏缺血再灌注处理,IRI组给予双侧肾蒂夹闭45 min后再灌注,分别于术后0、12、24、48、72 h收集血液及肾组织标本。自动分析法检测各组大鼠血清肌酐、血清尿素氮水平,肾组织PAS染色评估肾小管损伤情况,蛋白印迹法检测肾脏组织中MSS4的表达水平,免疫荧光染色检测MSS4、Vimentin在肾组织中的定位及表达情况。大鼠肾小管上皮细胞(NKR-52E)分为对照组和复氧组,对照组正常培养,复氧组缺氧6 h后分别复氧0、12、24、48、72 h。免疫荧光检测各时间点MSS4和a-SMA的表达,大鼠肾小管上皮细胞转染siRNA MSS4后检测缺氧/复氧后a-SMA的表达变化。[结果] 与假手术比较,IRI组尿素氮、肌酐以及肾小管损伤评分术后12 h明显升高(P<0.05),72 h肾功恢复正常,小管损伤未完全恢复。MSS4的表达水平在IRI后48开始升高,72 h更明显(P<0.05)。肾组织免疫荧光染色显示MSS4与Vimentin均定位于肾小管上皮细胞,72 h表达水平明显高于假手术组(P<0.01)。细胞免疫荧光染色显示,与对照组比较,NKR-52E细胞缺氧6 h复氧72 h后MSS4及a-SMA的表达水平明显增加(P<0.05),转染siRNA MSS4后a-SMA的表达明显降低(P<0.01)。[结论] MSS4在IRI大鼠肾脏中表达增加,参与AKI后肾小管上皮细胞上皮间质转化的调控。
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