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目的:对头顶一颗珠药材进行质量研究。方法:采用DNA条形码技术鉴定头顶一颗珠;基于ITS2序列鉴别头顶一颗珠药材及其混伪品;进行水分、灰分、浸出物检查;正交法优选延龄草总皂苷的最佳提取工艺。结果:DNA条形码研究获得ITS2、psb A-trn H主导单倍型;基于ITS2序列成功鉴别头顶一颗珠药材及其混伪品;延龄草总皂苷的最佳提取工艺为:70%乙醇,料液比1∶12,80℃提取3次,每次1.5 h。结论:该研究为头顶一颗珠质量标准的研究提供了参考。