【摘 要】
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目的对抗人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)单克隆抗体H5识别的抗原表位区域进行鉴定。方法设计4个NGAL截短体,通过PCR扩增截短体DNA片段并克隆到PET42a质粒中表达GS
【机 构】
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中国人民解放军空军第986医院检验科,陆军军医大学临床生化教研室
【基金项目】
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国家高技术发展研究计划“863”计划资助项目(2011AA02A113)
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目的对抗人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)单克隆抗体H5识别的抗原表位区域进行鉴定。方法设计4个NGAL截短体,通过PCR扩增截短体DNA片段并克隆到PET42a质粒中表达GST-NGAL截短体融合短肽。以此为抗原鉴定H5识别的抗原表位区域。随后根据生物信息学预测结果,化学合成2段潜在B细胞表位肽,用ELISA和Westernblot方法进一步鉴定。结果H5能与NGAL蛋白分子第20~36位氨基酸结合。结论单克隆抗体H5的抗原表位结合位点存在于成熟NGAL蛋白分子氨基末端第20~36位氨基酸处
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