【摘 要】
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探究铁皮石斛Dendrobiumofficinale对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导肠黏膜损伤的预防作用.采用40只SPF级8周龄C57BL/6J雄性小鼠,随机分为正常组(NC组)、模型组(LPS组)
【机 构】
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浙江中医药大学,浙江杭州310053;浙江工业大学,浙江杭州310014
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探究铁皮石斛Dendrobiumofficinale对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导肠黏膜损伤的预防作用.采用40只SPF级8周龄C57BL/6J雄性小鼠,随机分为正常组(NC组)、模型组(LPS组)、铁皮石斛超微粉不同剂量组(DOF-L组和DOF-H组,剂量分别为0.30,0.60 g·kg-1),每组10只.给药组小鼠每天灌胃等体积铁皮石斛超微粉混悬液,NC组和LPS组小鼠灌胃等量纯净水,连续7 d后,除NC组外,其余各组均腹腔注射5 mg·kg-1 LPS建立肠黏膜损伤小鼠模型.LPS注射6 h后,收集血浆和肠组织样本.生化法检测小鼠血浆中二胺氧化酶(diamine oxidase,DAO)和D-乳酸的水平;ELISA法检测促炎因子白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的水平;苏木素-伊红染色法观察小鼠回肠组织结构的病理变化;透射电镜观察小鼠回肠超微结构的变化;免疫组化法检测肠组织紧密连接蛋白claudin-l,occludin和F4/80的表达;蛋白免疫印迹法检测空肠Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR-4)、核转录因子κB(nuclear factor kappa B p65,NF-κBp65)蛋白的表达.结果显示,连续灌胃7 d铁皮石斛超微粉能明显减轻模型小鼠肠黏膜的病理损伤和超微结构改变;显著降低模型小鼠血浆中DAO和D-乳酸的水平(P＜0.05);明显增加回肠组织中claudin-1和occludin蛋白的表达;下调空肠组织中TLR-4和NF-κB p65蛋白的表达(P＜0.01),显著降低血浆中TNF-α和IL-6的水平(P＜0.05),并减少F4/80+巨噬细胞的浸润.提示铁皮石斛能明显减轻LPS所致肠黏膜损伤,降低肠道渗透性,其机制可能与其下调TLR-4/NF-κB p65信号通路、增加紧密连接蛋白的表达有关.
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