【摘 要】
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目的探讨6-羟基褪黑素的神经保护作用及作用机理。方法体外培养神经母细胞瘤N2a细胞,缺糖、缺血清和缺氧(OGSD)90min,再正常培养不同时间,同时加入6-羟基褪黑素,观察细胞生存
【机 构】
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华中科技大学同济医学院生物化学与分子生物学系,华中科技大学同济医学院生物化学与分子生物学系,华中科技大学同济医学院生物化学与分子生物学系,华中科技大学同济医学院生物化学与分子生物学系 430030武汉
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目的探讨6-羟基褪黑素的神经保护作用及作用机理。方法体外培养神经母细胞瘤N2a细胞,缺糖、缺血清和缺氧(OGSD)90min,再正常培养不同时间,同时加入6-羟基褪黑素,观察细胞生存能力(MTT法)、线粒体跨膜电位变化(荧光标记)、线粒体细胞色素C释放(western blot)、caspase 3活性(荧光底物)以及细胞内活性氧(荧光标记)的产生。结果6-羟基褪黑素抑制细胞色素C释放,抑制caspase 3激活,清除细胞内活性氧,稳定线粒体跨膜电位。结论6-羟基褪黑素通过直接抗氧化作用和抑制线粒体凋亡途径促进神经细胞生存。
Objective To explore the neuroprotective effect and mechanism of 6-hydroxymelatonin. Methods The neuroblastoma N2a cells were cultured in vitro for 90 min after hypoglycemia, ischemia and hypoxia (OGSD), and then cultured for different times. 6-hydroxymelatonin was added to observe the cell viability (MTT), mitochondrial transmembrane Potential changes (fluorescent labeling), mitochondrial cytochrome C release (western blot), caspase 3 activity (fluorescent substrate), and intracellular reactive oxygen species (fluorescence labeling). Results 6-hydroxymelatonin inhibited cytochrome C release, inhibited caspase 3 activation, cleared intracellular reactive oxygen species, and stabilized mitochondrial transmembrane potential. Conclusion 6-Hydroxymelatonin can promote the survival of nerve cells through direct anti-oxidation and inhibition of mitochondrial apoptosis pathway.
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